TriMethyl-Histone H3-K4 (Q16695/P68431) ウサギモノクローナル抗体（ChIP-Seq、CUT&Tag、WB用）

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンは、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームのコア成分を構成する、高度に保存された塩基性タンパク質です。ヒストンH3は、真核細胞のクロマチン構造に関与する5つの主要なヒストンタンパク質の1つです。H2A、H2B、H4と共にヒストンオクタマーを形成し、その周りに約147塩基対のDNAが巻き付くことで、ゲノムを凝縮し、転写装置へのアクセスを調節します。

ヌクレオソームの動態、特にヒストンテールの翻訳後修飾（PTM）は、エピジェネティック調節において重要な役割を果たします。ヒストンH3は、メチル化、アセチル化、リン酸化など、多数の修飾を受けます。これらは集合的に「ヒストンコード」を構成し、クロマチン構造と遺伝子発現を制御します。

これらのPTMの中でも、ヒストンH3のリシン4位のトリメチル化（H3K4me3）は、活性転写の特徴的なマークです。これは主に活性転写遺伝子のプロモーター領域に存在し、クロマチンリモデリング複合体や転写因子の募集に関与しています。本抗体は、H3K4のトリメチル化型を特異的に認識します。この修飾は、MLL複合体などのメチル基転移酵素によって媒介され、遺伝子活性化と関連しています。 関連参考文献： PMID:16267050 PMID:16457588 PMID:17194708

ヒストンH3.1t（H3-4遺伝子にコードされ、アクセッション番号Q16695）は、ヒストンH3.1の精巣特異的バリアントであり、精巣細胞で発現します。正規のヒストンH3.1（アクセッション番号P68431）は、大部分の組織で発現し、複数の遺伝子によってコードされています。両方のバリアントは高い配列類似性を共有し、ヌクレオソームのコア成分です。

細胞内局在は核内に限定され、染色体と関連しています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体は、ヒストンH3のリシン4位トリメチル化に対応する合成ペプチドを用いて作製されました。ChIP-seq、CUT&Tag、またはIFなどのアプリケーションでは、非メチル化ペプチドまたはアイソタイプ対照を用いたネガティブコントロールを含め、特異性を確認することを検討してください。
• 本抗体は、種間におけるH3 N末端テールの高い保存性により、広範な交差反応性を持つと予測されます。ただし、関連する実験系での検証が推奨されます。
• ウェスタンブロットでは、ヒストンH3に相当する約15 kDaのバンドが検出されるはずです。特にメチル化状態を分析する際は、ヒストンの適切な抽出を確認してください。
• ChIPアッセイでは、クロマチンの最適な切断（シアリング）と抗体の滴定を実験的に決定する必要があります。
• ELISAやDBなどの定量的アプリケーションでは、既知量のトリメチル化ペプチドを用いた標準曲線の使用を検討してください。
• 本抗体は、他のヒストン修飾抗体と組み合わせてマルチプレックスアッセイで使用し、ヒストンコードを組み合わせ的に研究することができます。

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