TriMethyl-Histone H3-K64 (Q16695/P68431) ウサギポリクローナル抗体 (WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA)

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンH3は、クロマチンの基本反復単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。ヌクレオソームはDNAを巻き付けて凝縮させ、転写、DNA修復、DNA複製、染色体安定性の維持などのプロセスに必要な細胞機構へのアクセスを調節します。したが、ヒストンはゲノムの構成と機能において中心的な役割を果たします。DNAのアクセシビリティは、ヒストンコードと呼ばれることが多いヒストン上の複雑な翻訳後修飾（PTM）の配列、およびヌクレオソームリモデリング活性を通じて動的に制御されています。

2つのアイソフォームがSwiss-Protアクセッション番号Q16695およびP68431で表されます。Q16695（ヒストンH3.1t、H3tまたはH3.4とも呼ばれる）は、主に精巣細胞で発現する精巣特異的ヒストンH3バリアントであり、精子形成中のクロマチン再編成に寄与していると考えられます。P68431（ヒストンH3.1）は、広く発現し、S期中に新しく合成されたDNAに堆積する正規の複製依存性ヒストンです。両方のアイソフォームは広範な配列相同性を共有し、クロマチン構造と機能を調節するメチル化、アセチル化、リン酸化など、多数のPTMを受けます。

リシン64（K64）のトリメチル化は、ヒストンH3テール内の特定のエピジェネティックマークですが、その正確な生物学的役割はまだ解明されています。他のヒストンメチル化イベントと同様に、エフェクタータンパク質のドッキングサイトとして機能するか、クロマチンの凝縮を変化させることによって遺伝子発現に影響を与えると考えられています。

関連参考文献： UniProt Q16695, UniProt P68431.

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• 使用されている免疫原は、ヒストンH3のリシン64周辺の領域に対応する合成トリメチル化ペプチドです（NP_003520.1に基づく）。この設計により、この残基におけるトリメチル化状態を特異的に認識できます。
• ウェスタンブロット（WB）については、ヒト、マウス、ラット、またはその他の脊椎動物サンプルの全細胞ライセートの使用を検討してください。約15 kDaの予測分子量は、還元および変性条件下で確認する必要があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）の場合、エピトープを露出させるために抗原回収法（クエン酸緩衝液による熱誘導エピトープ回収など）が必要な場合があります。H3.1tアイソフォームの精巣特異的発現を考慮し、陽性および陰性対照組織での染色を検証してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、最適な固定と透過処理の条件を実験的に決定する必要があります。広範囲に予測される交差反応性により、この抗体は多種比較研究に適しています。
• ELISAの場合、この抗体はトリメチル化H3-K64ペプチドまたは組換えタンパク質の検出に使用できます。非特異的結合を最小限に抑えるために、適切なブロッキングと洗浄工程を確実に行ってください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

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