WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用ユビキチンウサギポリクローナル抗体 - P0CG47

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ユビキチンの機能と局在

• ユビキチンはUBB遺伝子によってコードされ、ポリユビキチン-Bとして産生されます。これは前駆体タンパク質であり、プロセッシングを受けて成熟したユビキチンモノマーとなります。ユビキチンは、標的タンパク質の翻訳後修飾に関与する高度に保存された76アミノ酸のタンパク質です。
• ユビキチンは、他のタンパク質に共有結合しているか、または遊離（非固定）の状態で存在します。共有結合している場合、イソペプチド結合を介して標的タンパク質と結合し、モノマー（モノユビキチン）または異なるLys残基（Lys-6、Lys-11、Lys-29、Lys-33、Lys-48、Lys-63）を介して連結されたポリユビキチン鎖、あるいは開始Metを介して連結された直鎖を形成します。
• ポリユビキチン鎖の連結様式の違いは、異なる細胞内結果を決定します。Lys-48連結鎖はタンパク質をプロテアソーム分解の標的とし、一方、Lys-63連結鎖はエンドサイトーシス、DNA損傷応答、およびNF-kappa-Bシグナル伝達に関与します。その他の連結（Lys-6、Lys-11、Lys-29、Lys-33）は、DNA修復、ERAD、細胞周期制御、およびキナーゼ修飾に関与します。
• 結合型に加えて、遊離の非固定ポリユビキチン鎖も、タンパク質キナーゼの活性化や他のシグナル伝達経路の調節などのシグナル伝達役割を持っています。
• ユビキチンは、細胞質、核、ミトコンドリア外膜を含む複数の細胞内区画に局在しており、細胞プロセスへの広範な関与を反映しています。
• ユビキチン自体の翻訳後修飾には、その機能を調節するリン酸化とADP-リボシル化が含まれます。このタンパク質はイソペプチド結合を含み、Ubl結合経路の一部です。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ポリユビキチン-B前駆体に相当する全長ユビキチン（アミノ酸1-228）を含みます。このポリクローナル抗体は、遊離ユビキチンとユビキチン結合タンパク質の両方を認識すると期待されますが、ポリユビキチン鎖も検出する可能性があります。WBでは、モノマーユビキチンとポリユビキチン結合体を区別するために、変性および還元条件を使用することを検討してください。
• IHC-Pの場合、抗原回復は検出を向上させる可能性があり、特異性を確認するために適切なコントロール（ノックダウンまたはノックアウトサンプルの使用など）を使用することが推奨されます。ユビキチンは広く分布しているため、シグナルは拡散している可能性があります。
• IF/ICCでは、ユビキチンの局在は区画によって異なるため、固定と透過処理の方法を最適化する必要があります。オルガネラマーカーとの二重染色は、解釈に役立ちます。
• ELISAプロトコルには、遊離または全ユビキチンレベルを定量するために、組換えユビキチンを使用した標準曲線を含める必要があります。抗体が特定のアッセイ形式とサンプルタイプについて検証されていることを確認してください。
• この抗体は、広範囲な交差反応性が予測されます。ヒト以外の種については、配列相同性は高いですが変動する可能性があるため、関連するサンプル系で反応性を検証してください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioは、IVD原材料のためのワンストップ調達ソリューションを提供し、検証された抗体ペア、最適化されたポリクローナルおよびモノクローナル抗体、バルク補助試薬、および希少な標的原材料の調達を通じて、診断メーカー、研究ラボ、および研究所を支援します。このユビキチン抗体は、タンパク質分解、細胞シグナル伝達、および疾患バイオマーカーの研究をサポートしており、CamelBioは、コンセプトから臨床まで、プロジェクトのニーズを満たすための材料のスケールアップやカスタマイズを支援することができます。