WBおよびELISA用抗WNK1ウサギポリクローナル抗体 - Q9H4A3

製品の主な仕様およびパラメータ

生物学的背景：WNK1の機能と局在

• WNK1（リジン欠損型タンパク質キナーゼ1）は、WNK-SPAK/OSR1キナーゼカスケードのマスター調節因子として機能するセリン／スレオニンタンパク質キナーゼであり、イオン共輸送体の活性および全身血圧を厳密に制御します（PubMed:15883153、PubMed:17190791、PubMed:31656913）。
  関連文献： PMID:15883153、PMID:17190791、PMID:31656913
• 高浸透圧ストレス下では、WNK1は分子混雑センサーとして働き、液-液相分離を起こして膜を持たないコンパートメントを形成します。これにより、WNK1とその基質であるOXSR1/OSR1およびSTK39/SPAKが濃縮され、下流のリン酸化および調節性容積増加が促進されます（PubMed:36318922）。
  関連文献： PMID:36318922
• WNK1は標準的なキナーゼカスケードに加えて、OXSR1/OSR1を活性化して走化性を促進し、STK39/SPAKを活性化して内皮細胞の増殖を促進することで、キナーゼ依存的に血管新生を調節します（PubMed:25362046）。また、SYT2、PCF11、NEDD4Lなどの追加基質をリン酸化し、それぞれシナプス小胞結合、mRNA輸送（PubMed:29196535）、膜タンパク質の安定性を調節します。
  関連文献： PMID:25362046、PMID:29196535
• キナーゼ活性を欠く腎臓特異的アイソフォームは、全長WNK1に対するドミナントネガティブ調節因子として働き、遠位ネフロンにおけるナトリウムおよびカリウムのバランスを調節します。一方、WNK1のキナーゼ非依存的な足場機能は、SLC4A4、SLC26A6、TRPV4、CFTRなどの各種輸送体およびチャネルの膜局在を制御し、mTORC2のリクルートを介してSGK1の活性化を促進します（PubMed:14645531、PubMed:36373794）。
  関連文献： PMID:14645531、PMID:36373794
• WNK1は広範に発現しており、精巣、心臓、腎臓、骨格筋で最も高い発現レベルを示します。また、後根神経節および腎臓の遠位尿細管／接続尿細管に特異的に存在し、侵害受容および電解質恒常性における機能と一致します。
• 細胞内では、WNK1は細胞質、核、分裂紡錘体に局在し、アクチン細胞骨格の再編成、有糸分裂期の細胞分離、オートファジーの負の制御に関与します（PubMed:10660600、PubMed:21220314、PubMed:27911840）。
  関連文献： PMID:10660600、PMID:21220314、PMID:27911840
• 翻訳後修飾にはリン酸化、ユビキチン化、グリコシル化が含まれます。また、このタンパク質は塩化物イオン感受性を持ち、変異は遺伝性感覚・自律神経ニューロパチーII型（HSAN2）および偽性低アルドステロン症と関連しています。

実験上の指針および技術的ヒント

• 免疫原はヒトWNK1のN末端領域（アミノ酸1～210）に相当するため、全長アイソフォームと腎臓特異的アイソフォームの両方を認識する可能性があります。関連する細胞または組織のライセートで検出を検証してください。
• ウエスタンブロットでは、約250 kDa付近にバンドが予想されます。ただし、複数のアイソフォームや潜在的な切断産物が観察される場合があります。高分子量タンパク質に適した新鮮なプロテアーゼ阻害剤と最適化された転写条件の使用を検討してください。
• ELISAでは、精製した組換えタンパク質またはペプチドを陽性対照として使用し、アッセイの感度および特異性を確立すると有用な場合があります。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されています。可能な場合は、適切な対照（例：ノックアウトライセートまたはブロッキングペプチド）を用いて、目的の種における反応性を確認してください。
• リン酸化依存的シグナル伝達を研究する場合、このポリクローナル抗体はリン酸化部位特異的ではない点に注意してください。WNK1の活性化状態をモニタリングするには、リン酸化部位特異的抗体と併用してください。

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